Nova Koronaviruso (SARS-Cov-2) Nukleika Acida Detekta Ilaro
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluercoscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Nova Koronaviruso (SARS-Cov-2) Nukleika Acida Detekta Ilaro (Fluoreska RT-PCR Sonda Metodo)
【Packaging specifications 】25 Testoj/Kit
【Intended usaĝo】
Ĉi tiu ilaro estas uzata por kvalita detekto de nuklea acido de nova koronavirus en nazofaringaj swavaĵoj, orofaringaj (gorĝaj) swavaĵoj, antaŭaj nazaj lavaĵoj, mez-turbinataj lavaĵoj, nazaj lavoj kaj nazaj aspiroj de individuoj, kiuj estas suspektataj pri COVID19 de ilia sanprovizanto. La detekto de ORF1ab kaj N-genoj de la nova koronavirus povas esti uzata por helpa diagnozo kaj epidemiologia monitorado de nova koronavirus-infekto.
【Principles of the procedure 】
Ĉi tiu ilaro estas dizajnita por specifaj TaqMan-enketoj kaj specifaj enkondukoj desegnitaj por la nova koronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab kaj N-gensekvencoj. La PCR-reagsolvo enhavas 3 arojn de specifaj enkondukoj kaj fluoreskaj enketoj por specifa detekto de celoj, kaj kroma aro de specifaj enkondukoj kaj fluoreskaj enketoj estas utiligita kiel la interna norma kontrolo de la ilaro por detektado de endogenaj mastrumaj genoj.
La testa principo estas, ke la specifa fluoreska sondilo estas digestita kaj degradita per la eksonukleaza agado de la Taq-enzimo en la PCR-reago, tiel ke la raportisto fluoreska grupo kaj la estingita fluoreska grupo estas apartigitaj, tiel ke la fluoreska monitora sistemo povas ricevi fluoreskecon. signalo, kaj tiam Tra la riĉiga efiko de PCR plifortigo, la fluoreskeco signalo de la sondilo atingas fiksita sojlo valoro-Ct valoro (Ciklo sojlo). En la kazo de neniu cela amplikono, la raportistogrupo de la enketo estas proksima al la estinga grupo. En ĉi tiu tempo, la fluoreskeca resonanca energiotransigo okazas, kaj la fluoreskeco de la raportistogrupo estas estingita de la estinga grupo, tiel ke la fluoreska signalo ne povas esti detektita per la fluoreska PCR-instrumento.
Por kontroli la uzon de reakciiloj dum la testo, la ilaro estas ekipita per pozitivaj kaj negativaj kontroloj: la pozitiva kontrolo enhavas la cel-lokan rekombinan plasmidon, kaj la negativa kontrolo estas Distilita akvo, kiu estas uzata por monitori median poluon. Oni rekomendas agordi pozitivan kontrolon kaj negativan kontrolon samtempe dum testado.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Komponentoj | |
| Name | Speciĝo | Kvantoity | Kvantoity | |
| Pozitiva kontrolo | 180 μL/fiolo | 1 | 1 | Artefarite konstruitaj plasmidoj, Distilita akvo |
| Negativa kontrolo | 180 μL/fiolo | 1 | 1 | Distilita akvo |
| Miksaĵo SARS-Cov-2 | 358,5 μL/fiolo | 1 | / | Specifaj enkondukaj paroj, specifaj detektaj fluoreskaj enketoj, dNTPoj, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Distilita akvo, ktp. |
| Enzima Miksaĵo | 16,5 μL/fiolo | 1 | / | Taq-enzimoj, inversa transkriptazo, UNG-enzimoj, ktp. |
| Miksaĵo SARS-Cov-2 (Liofiligita) | 25 testoj/fiolo | / | 1 | Specifaj enkondukaj paroj, specifaj detektaj fluoreskaj enketoj, dNTPoj, Taq-enzimoj, inversa transkriptazo, Distilita akvo, ktp. |
| 2x Bufro | 375 μL/fiolo | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Distilita akvo, ktp. |
Notu：(1) La komponantoj en malsamaj bataj iloj ne povas esti miksitaj aŭ interŝanĝitaj.
(2) Preparu vian propran reakciilon: Nukleika acida eltira ilaro.
【Storage conditions kaj expiration date 】
For BST-SARS-25:Transportu kaj konservu je -20±5℃ dum longa tempo.
For BST-SARS-DR-25:Transportu ĉe ĉambra temperaturo. Konservu ĉe -20±5℃ dum longa tempo.
Evitu ripetajn ciklojn de frosto-degelo. La validecperiodo estas provizore fiksita por 12 monatoj.
Vidu la etikedon por la dato de fabrikado kaj uzo.
Post la unua malfermo, la reakciilo povas esti stokita je -20±5 °C dum ne pli ol 1 monato aŭ ĝis la fino de la reakciila periodo, laŭ kiu ajn dato okazas unue, por eviti ripetajn frostitajn ciklojn kaj la nombron da reakciilo frostigas. -degelcikloj ne devus superi 6 fojojn.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Applicable specimena tipo: Ekstraktita nuklea acida solvo.
2.Stokado kaj transportado de specimenoj: Konservu je -20±5℃ dum 6 monatoj. Frostigu kaj degelu la specimenojn ne pli ol 6 fojojn.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Elektu taŭgan eltiran ilaron de nuklea acido por ĉerpi virusan nuklean acidon, kaj sekvu la respondajn ilarajn instrukciojn. Oni rekomendas uzi nukleacidan eltiran kaj purigan ilaron produktitan de Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. aŭ ekvivalentan nukleacidan purigan ilaron.
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Forigu la SARS-Cov-2 Miksaĵon kaj Enziman Miksaĵon, tute fandi ĉe ĉambra temperaturo miksaĵo plene per Vortex-aparato kaj poste centrifugu mallonge.
(2) 16.5uL Enzima Miksaĵo estis aldonita al 358.5uL SARS-Cov-2 Mix kaj miksita ĝisfunde por akiri la miksitan reakcian solvon.
(3) Preparu puran 0.2 mL PCR-oktan tubon kaj marku ĝin per 15uL de la ĉi-supra miksita reakcia solvo por puto.
(4) Aldonu 15 μL da purigita nuklea acida solvaĵo, la pozitivan kontrolon kaj la negativan kontrolon, kaj zorge kovru la oktaltuban ĉapon.
(5) Miksu bone renversante, kaj rapide centrifugu por koncentri la likvaĵon ĉe la fundo de la tubo.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Aldonu 375ul 2x Buffer al SARS-Cov-2 Miksaĵo ((Liofiligita) por prepari la reakcian miksaĵon. Miksu plene per pipetaĵo kaj poste centrifugu mallonge. （Post kiam reakcia miksaĵo estas preta, oni rekomendas konservi ĉe -20℃ je -20℃. longtempa konservado.）
(2) Preparu puran 0.2 mL PCR-oktan tubon kaj marku ĝin per 15μL da reakcia miksaĵo po puto.
(3) Aldonu 15μL da purigita nuklea acida solvo, la pozitivan kontrolon kaj la negativan kontrolon, kaj zorge kovru la oktaltuban ĉapon.
(4) Miksu bone renversante renverse, kaj rapide centrifugu por koncentri la likvaĵon ĉe la fundo de la tubo.
3. PCR amplification （Bonvolu konsulti la manlibron de la instrumento por operaciaj agordoj.）
3. 1 Metu la PCR-8-tubon en la specimenan ĉambron de la fluoreska PCR-instrumento, kaj starigu la provutan specimenon, la pozitivan kontrolon kaj la negativan kontrolon laŭ la ordo de ŝarĝo.
3.2 Fluoreskeca detekta kanalo:
(1) ORF1ab-geno elektas la detektan kanalon de FAM (Raportisto: FAM, Quencher: Neniu).
(2) N-geno elektas la detektan kanalon de VIC (Raportisto: VIC, Quencher: Neniu).
(3) Interna norma geno elektas la detektan kanalon de CY5 (Raportisto: CY5, Quencher: Neniu).
(4) La Pasiva Referenco estas agordita al ROX.
3.3 Agordo de parametroj de PCR-programo:
| Paŝo | Temperaturo (℃) | Tempo | Nombro de cikloj | |
| 1 | Inversa transskriba reago | 50 | 15 min | 1 |
| 2 | Aktivigo de Taq-enzimo | 95 | 2,5 min | 1 |
| 3 | Aktivigo de Taq-enzimo | 93 | 10 s | 43 |
| Anela etendo kaj fluoreskeca akiro | 55 | 30 s | ||
Post agordo, konservu la dosieron kaj rulu la reagprogramon..
4.Results analysis
Post kiam la programo finiĝas, la rezultoj estas aŭtomate konservitaj, kaj la plifortiga kurbo estas analizita. La plifortiga kurbo estas agordita al la instrumenta defaŭlta sojlo.
【Explanation of test results 】
1. Determini la validecon de la eksperimento: La pozitiva kontrolo FAM, VIC-kanalo devus havi tipan plifortigan kurbon, kaj la Ct-valoro estas ĝenerale malpli ol 34, sed povas variar pro malsamaj sojlaj agordoj de malsamaj instrumentoj. La negativa kontrolo FAM, VIC-kanalo devus esti ne-amplifita Ct. Estas konsentite, ke la supraj postuloj devas esti plenumitaj samtempe, alie ĉi tiu testo estas malvalida.
2. Rezulta juĝo
| FAM/VIC-kanalo | Juĝrezulto |
| Ct＜37 | Specimena testo estas pozitiva |
| 37≤Ct<40 | La plifortiga kurbo estas S-forma, kaj suspektindaj specimenoj devas esti reekzamenitaj; se la reekzamenaj rezultoj estas konsekvencaj, ĝi estas taksata kiel pozitiva, alie ĝi estas negativa |
| Ct≥40 Aŭ Neniu Plifortigo | Specimena testo estas negativa (aŭ sub la pli malalta limo de ilaro detekto) |
Notu: (1) Se kaj la FAM-kanalo kaj la VIC-kanalo estas pozitivaj samtempe, la SARS-Cov-2 estas decidita esti pozitiva.
(2) Se la FAM-kanalo aŭ VIC-kanalo estas pozitiva kaj la alia kanalo estas negativa, la testo devas esti ripetita. Se ĝi estas pozitiva samtempe, ĝi estos juĝita kiel SARS-Cov-2 pozitiva, alie ĝi estos juĝita kiel SARS-Cov-2 negativa.
Rilataj produktoj
-
COVID-19 IgM/IgG Antikorpa Detekta Kit
COVID-19 IgM/IgG Antikorpa Detekta Ilaro （Koloida Ora Imunokromatografio-Metodo) Produkta Manlibro 【PRODUTNOMO】COVID-19 IgM/IgG Antikorpa Detekta Ilaro （Koloida Ora Imunokromatografio-Metodo) 【PAKAJ Testoj【10/SPECIFICOJ 10/SPECIFICOJ RESUMO】 La novaj koronavirusoj apartenas al la β-genro. COVID-19 estas akra spira infekta malsano. Homoj estas ĝenerale sentemaj. Nuntempe, la pacientoj infektitaj de la nova koronavirus estas la ĉefa fonto...
-
Nukleika Acida Eltiro Aŭ Puriga Ilaro
Nuklea Acida Eltiro Aŭ Puriga Ilaro aŭ stokita ĉe -20℃. La specimeno devas esti transportita per 0 ℃ buklado. Enkonduko La Nuklea Acida Eltiro Aŭ Puriga Ilaro (Magneta Bida Metodo) estas desegnita por la aŭtomatigita purigo de RNA kaj DNA de korpaj fluidoj (kiel ekzemple swabs, plasmo, serumo) uzante aŭtomatigitajn nukleajn eltirajn instrumentojn. Magnetpartikla teknologio provizas altkvalitan DNA/RNA taŭgan por ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Imunokromatogr...
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Imunokromatografio-Metodo) Produkta Manlibro 【PRODUTNOMO】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （Imunokromatografio-Metodo) 【PAKAJ SPECIFICIO】 1 Testo/Kit 【RESUMO】 La genro de la koronavirusoj apartenas. COVID-19 estas akra spira infekta malsano. Homoj estas ĝenerale sentemaj. Nuntempe, la pacientoj infektitaj de la nova koronavirus estas la ĉefaj...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Imunokromatografio-Metodo) Produkta Manlibro 【PRODUKTONOMO】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Imunokromatografio-Metodo) 【PAKAJ SPECIFICADOJ】 1 Testo/Kit, 25Tests/Kit】Kit, 1000】Kit novaj koronavirusoj apartenas al la β-genro. COVID-19 estas akra spira infekta malsano. Homoj estas ĝenerale sentemaj. Nuntempe, la pacientoj infektitaj de la nova koronavirus estas la ĉefa fonto de infekto; sensimptomaj infektitaj homoj...